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時間分辨熒光免疫技術(shù),開啟iPOCT智能檢測新時代!

2017-06-02

         每年一度的產(chǎn)品大爆炸時刻,今年落在青島了。不負(fù)所望,這屆檢驗醫(yī)學(xué)暨輸血儀器試劑博覽會上,單是POCT類廠商就達到了前所未有的規(guī)模,瑞輝生物更是躋身“中國最具工匠精神的IVD企業(yè)”的前十名。

 

        科技發(fā)展日新月異,很多標(biāo)志物的檢測靈敏度需要達到pg/ml級別,以膠體金層析為基礎(chǔ)的第一代POCT產(chǎn)品,通過加大樣本用量、延長反應(yīng)時間等方式仍無法滿足靈敏度的要求,現(xiàn)已逐漸退出歷史舞臺。取而代之是普通熒光免疫層析產(chǎn)品,其靈敏度有所提高,但普通熒光免疫層析采取熒光素作為標(biāo)記物,結(jié)果受雜光的影響無法消除,定量不精準(zhǔn)。最新一代POCT產(chǎn)品應(yīng)運而生,時間分辨熒光免疫層析技術(shù),以熒光微球為標(biāo)記物,高靈敏度,且無雜光干擾,定量更準(zhǔn)確。

1、標(biāo)記物選擇:熒光素和熒光微球

 

        熒光素是分子量幾百至上千的小分子化合物,通過活性基團與抗體(抗原)進行交聯(lián),并在最終的使用中產(chǎn)生熒光效應(yīng),用于定量。熒光素種類繁多,激發(fā)光范圍幾乎覆蓋紫外到紅外區(qū)段。但結(jié)果受雜光的影響無法消除,定量不準(zhǔn)確。如下圖:

 

                                             

        熒光微球是以鑭系元素(最常用的是銪Eu)填充至納米級的聚苯乙烯微球中制作而成。微球與抗體(抗原)交聯(lián)后,可用于抗原(抗體)檢測。熒光微球比熒光素有更大的Stock位移,例如最常見的Eu,激發(fā)光在365nm,而發(fā)射光在610nm左右,Stocks位移大于200nm,可以有效排除激發(fā)光和非特異性熒光對信號采集的干擾,提高檢驗的特異性。Eu屬惰性元素,與熒光素相比,不易被光漂白,結(jié)果更穩(wěn)定。

 

      熒光微球具有很長的熒光衰減時間(500~2000uS),而熒光素的熒光信號衰減時間都非常短(5~100uS),基于這點,熒光微球可以開發(fā)出時間分辨技術(shù)??梢赃m當(dāng)延遲測量時間,待背景熒光完全衰減后測定,可消除激發(fā)光的干擾,提高檢驗的準(zhǔn)確性。

 

         基于以上兩點,我們說納米微球時間分辨熒光開啟了POCT標(biāo)志物檢測技術(shù)的新十年,并不為過。

 

 

時間分辨熒光與普通熒光的對比圖

 

 

2、操作簡化:一步法和兩步法

 

        所謂一步、兩步是指操作步驟。

 

       一步法簡化了人員操作,只需將樣本加入反應(yīng)板即可,這對低靈敏度項目(例如MAU)來說,基本滿足了性能要求(主要是精密性和準(zhǔn)確性)也減輕了操作強度。但對于心臟標(biāo)志物這種高靈敏度且對急性心血管疾病診斷極有價值的項目,一步法以操作換性能的方式就顯得尷尬。

 

        兩步法和一步法相比,在加入反應(yīng)板前,先將樣本進行稀釋處理,有效排除樣本中雜質(zhì)的干擾,從而提高精密性和準(zhǔn)確性,可以確保檢測結(jié)果不會因性能不足誤導(dǎo)患者治療。

 

3、抗原抗體

 

       俄羅斯航空發(fā)動機終身院士法沃爾斯基說過這樣的話:“所有飛行器上的東西,它們都是提高阻力增加重量的,唯獨發(fā)動機是提高動力的。只要發(fā)動機好,綁上一塊木板也能飛起來。”

 

       這個道理在以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的產(chǎn)品中同樣適用。好的抗原抗體猶如好的發(fā)動機,在任何情況下,皆需選用優(yōu)質(zhì)且穩(wěn)定性好的生物原料??乖贵w的質(zhì)量至少占了產(chǎn)品品質(zhì)的50%的權(quán)重。因此,瑞輝生物產(chǎn)品使用的抗原抗體來源于國際知名廠家,并通過嚴(yán)格質(zhì)控、匹配,確保產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

 

4、國產(chǎn)設(shè)備的春天

 

        2017年1月份,四川省政府采購網(wǎng)掛出的《四川省財政廳關(guān)于公布 2017 年度省級政府采購進口產(chǎn)品清單的通知》明令要求二甲及以下醫(yī)院(或單位)應(yīng)使用93 種醫(yī)療設(shè)備的國內(nèi)產(chǎn)品; 國家層面更是將浙江、上海、江蘇、廣東和四川 5 省市列入扶持國產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備首批試點推廣范圍。

 

        2017年3月份,中國醫(yī)學(xué)裝備協(xié)會公布了第三批優(yōu)秀國產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備產(chǎn)品目錄,POCT產(chǎn)品第一次進入優(yōu)秀國產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備的目錄。

 

        政府和協(xié)會不謀而合的節(jié)奏,似乎也在誥召天下,國產(chǎn)設(shè)備的春天不遠了,尤其對時間分辨熒光免疫層析技術(shù)來講是特大的利好。瑞輝生物抓住時代給予的紅利,不斷提升產(chǎn)品綜合實力,把POCT時間分辨免疫層析技術(shù)提升到一個新的高度,聚焦精準(zhǔn)醫(yī)療,開啟iPOCT智能檢測新時代!

 

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